本公司生产的 Bst DNA Polymerase, Large Fragment (powder)即嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus, Bst) DNA Polymerase I 大片段，具有 5'→3' DNA 聚合酶活性，不具有 3'→5'和 5'→3'的核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有很强的链置换(stranddisplacement)能力，可应用于核酸的等温扩增反应，如环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)和滚环扩增(Rolling-circle amplification, RCA)等。Bst DNA Polymerase, Large Fragment 介导的等温扩增温度一般在 50-68℃之间，通常为 65℃。与Bst DNA Polymerase 2.0 相比，本产品在进行等温扩增时不具有将 dUTP 掺入合成的 DNA 链的能力。Bst DNA Polymerase 具有 5'→3'的核酸外
切酶活性，而 Bst DNA Polymerase, Large Fragment 通过删除突变而缺失了 5'→3'核酸外切酶活性。
组分和说明

产品应用
环介导等温扩增 LAMP、解旋酶等温基因扩增(HDA)等 DNA 等温扩增，多重置换扩增(MDA)，全基因组扩增(WGA)，高 GC 含量 DNA 的测序，纳克级 DNA 模板的快速测序，建库测序等。
产品优势
酶活性好，在进行等温扩增时不具有将 dUTP 掺入合成的 DNA 链的能力。强大的链置换能力、高灵敏度和高特异性、高保真性和热稳定性。
使用说明
1.以 LAMP 等温扩增为例，参考下表设置反应体系。

注 1：在配制反应体系完成后，可每 25μl 体系的反应管管盖加适量高浓度的 SYBR Green I 1μl，待等温扩增反应结束后，8000g 离心 1min，
反应体系变荧光绿为阳性，保持无色或棕色为阴性。也可以无需添加指示剂，待反应程序结束后，可见反应液明显变浑浊为阳性，反应
液保持透明为阴性。
注 2：如需优化反应，可调整 Mg2+浓度(4-10mM)，酶量(0.04-0.32U/μl)或改变反应温度(50-68℃)。
注 3：如果通过琼脂糖凝胶电泳或其它需要打开 LAMP 反应容器的方法进行分析，请设置辅助分析区域和设备，以避免污染。
注 4：由于反应比较迅速，为了确保实验的重现性，建议模板 DNA 最后加入。
注 5：强烈建议设置未加模板的阴性对照，以确保扩增的特异性。
注 6：为了防止在配置试剂时发生污染，请务必在超净工作台内进行操作。
注 7：试剂及模板 DNA 的配置操作尽量需要和 PCR 产物的电泳等分析在不同的区域进行，以免发生污染。
3.反应程序：65℃ 60min。
4.灭活：80℃ 20min。
5.如实验需要，可以用 1.5%的琼脂糖凝胶进行电泳分析，电泳图显示扩增产物为梯度条带为阳性，无梯度条带为阴性。
注意事项：
（1）本产品为冻干粉，使用前需要先溶解，请使用推荐的溶解储存液进行溶解，溶解后的酶需要分装后保存于-20℃，避免反复冻融。
（2）Bst DNA Polymerase, Large Fragment 不具有 3'→5'核酸外切酶活性。
（3）建议等温扩增反应温度不能高于 70ºC，否则会导致酶失活。
（4）Bst DNA Polymerase，Large Fragment 不能用于热循环测序和 PCR。
（5）每次等温扩增实验注意设置无模板 DNA 作为阴性对照。
（6）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
（7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。