pET-N-GST-PreScission是一种用于表达N端含有GST标签(Glutathione S-transferase tag, GST tag)的目的蛋白的原核表达质粒。本质粒N端GST标签后含有PreScission酶切位点，可通过PreScission Protease 切除N端的GST标签。本质粒为卡那霉素抗性。本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面有一个GST标签的编码序列。因此在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有GST标签的目的蛋白。本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP，对应的核酸序列为CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease切除N端的GST标签。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。通常可以采用如 GST-tag Purification Resin 和GST标签蛋白纯化试剂盒等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用GST抗体检测和少量地分离纯化目的蛋白。pET-N-GST-PreScission质粒的主要信息如下：pET-N-GST-PreScission质粒(5943bp)的图谱如下：pET-N-GST-PreScission中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-PreScission)包括：pET-N-GST-PreScission中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-PreScission once)包括：pET-N-GST-PreScission质粒中推荐使用的测序引物序列如下：pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′pET-R primer (5857-5876): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′pET-N-GST-PreScission的全序列信息：D2916 pET-N-GST-PreScission.txt。 不同原核表达质粒的比较和选择，以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页：http://www.aladdin-e.com/

注意事项：

使用说明：