产品名称 | Anstart Taq II DNA Polymerase | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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别名 | 启动 Taq II DNA 聚合酶 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格或纯度 | 5U/μL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品介绍 | 热激条件:95℃,2.5min 外切酶活性:5’→3’ 防污染体系搭配:√ ARMS:√ SNP:√ 荧光定量PCR:√ 额外添加AT载体连接:√ 推荐项目:定性PCR、定量PCR 产品说明 Anstart Taq II DNA 聚合酶是抗 Taq单克隆抗体和 Taq II DNA 聚合酶的混合制品。是在原Anstart Taq DNA Polymerase (MD006)产品的升级款,具有更好的稳定性和特异性。高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq聚合酶结合从而抑制聚合酶的活性,达到抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增作用。当扩增反应体系被加热到 95℃ 2min时,聚合酶活性因抗Taq单克隆抗体变性得到恢复,因此无需特殊失活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。通过与改良的buffer配合使用,快速激活,能有效增加反应产物的量和提高PCR反应灵敏度和特异性。可应用与热启动PCR,扩增复杂模板,低拷贝靶片段扩增。 产品内容 1. Anstart Taq II DNA Polymerase ( 5 U/μl ) 2. 10×Anstart Taq II Buffer (without Mg2+ ) 3. 100mM MgCl2 产品用途 热启动法进行PCR 扩增。 使用方法 1.PCR 反应体系的设置 a.溶解并混匀 PCR 反应所需的各种溶液,并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应 PCR 液体分装使用,避免反复冻融。 b.参考下表设置 PCR 反应,建议 PCR 反应体系的配置在冰浴或在冰盒上进行:
*对于不同类型的模板在 50μl 反应体积中推荐用量如下: 哺乳动物基因组 DNA:0.1-1μg 大肠杆菌基因组 DNA:10-100ng 质粒 DNA:0.1-10ng 过多的模板 DNA 容易导致非特异性的 PCR 产物 c.用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。 d.各设置好的 PCR 反应管置于 PCR 仪上,开始 PCR 反应。 2.PCR 反应参数的设置以扩增 1Kb 目的片段为例
a.PCR 反应的设置需根据模板、引物、PCR 产物的长度和 GC 含量等条件的不同设定不同的 PCR 反应条件包括温度、时间和循环数等。 b.STEP4(延伸)的时间设置需根据 PCR 产物的长度进行设置,通常每 kb 产物的延伸时间为 1min。例如 PCR 产物的长度为 1kb,则延伸时间可以设置为 1min,PCR 产物的长度为 2kb,则延伸时间可以设置为 2min,以此类推。 c. 对于初次进行的 PCR,为尽量确保可以扩增出预期的 PCR 产物,可以把循环数设置为 35。对于需进行半定量或定量的 PCR 反应循环数一定要进行适当优化,使 PCR 反应达到平台期。 |
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