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  • pET-N-His-TEV
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  • pET-N-His-TEV

    实验室试剂
    阿拉丁
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


稳定性与储存

阿拉丁P748965


-20℃保存。

英文名称pET-N-His-TEV
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

pET-N-His-TEV是一种用于表达N端含有His标签(His tag)的原核表达质粒。本质粒N端His标签后含有TEV酶切位点，可通过TEV Protease 切除N端的His标签。本质粒为卡那霉素抗性。本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面，带有一个His标签的编码序列，含有6个组氨酸(6XHis)。因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有His标签的目的蛋白。本载体在N端His标签与多克隆位点之间含有TEV蛋白酶(TEV Protease)识别的七肽序列ENLYFQG，对应的核酸序列为GAGAACCTGTACTTCCAAGGG，因此可在目的蛋白纯化后用TEV蛋白酶切除N端His标签。TEV蛋白酶酶切发生在七肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除His标签的时候目的蛋白的N端会留下一个额外的氨基酸残基G。通常可以采用如 His-tag Purification Resin 或His标签蛋白纯化试剂盒等纯化本质粒表达的目的蛋白，也可以使用His-tag抗体(AH367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。pET-N-His-TEV质粒的主要信息如下：pET-N-His-TEV质粒(5304bp)的图谱如下：pET-N-His-TEV中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-TEV)包括：pET-N-His-TEV中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-TEV once)包括：pET-N-His-TEV质粒中推荐使用的测序引物序列如下：T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′pET-R primer (5218-5237): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′pET-N-His-TEV的全序列信息：D2905 pET-N-His-TEV.docx。不同原核表达质粒的比较和选择，以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页：http://www.aladdin-e.com/


注意事项：

本质粒未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


使用说明：

1.首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。3.pET-N-His-TEV质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。


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备注：无质量问题不做退换货处理，下单前请仔细确认，感谢配合！