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  • UltraBio™293F Plus转染试剂
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  • UltraBio™293F Plus转染试剂

    实验室试剂
    阿拉丁
    2万以上
    • ￥612.90-25392.90
      ￥0.00
      ￥612.90-25392.90
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:2万以上
商品描述


品牌货号


稳定性与储存

阿拉丁P751604


4ºC保存，两年有效。长期不使用可以-20ºC保存。

英文名称UltraBio™293F Plus Transfection Reagent
储存温度2-8°C储存
运输条件冰袋运输
产品介绍

阿拉丁生产的UltraBio™293F Plus转染试剂(UltraBio™293F Plus Transfection Reagent)是一种非常高效的基于改良的阳离子脂质体的新型转染试剂，专门适用于悬浮培养的HEK293细胞，如Freestyle™ 293-F等，进行质粒转染和重组蛋白大量表达。本产品与Thermo公司的293fectin™ Transfection Reagent和Merck公司的293-Free™ Transfection Reagent的用途和使用效果基本一致或更佳，与Thermo公司的FreeStyle™ MAX Reagent相比，用于悬浮培养的293细胞时效果基本一致或略佳。UltraBio™293F Plus转染试剂对Expi293F™或Freestyle™ 293-F细胞的转染效率非常高(约90%)，同时具有细胞毒性极低、重复性好、操作简单、转染后无需更换培养液等突出优点。悬浮培养293系列细胞转染试剂的比较和选择请参考：http://www.aladdin-e.com/。UltraBio™293F Plus转染试剂也同样适用于293系列贴壁细胞的转染，但转染293系列贴壁细胞时，推荐使用性价比更高的UltraBio™293 Plus转染试剂或UltraBio™293转染试剂。UltraBio™293F Plus转染试剂兼容性好，细胞转染可允许血清和抗生素存在的情况下进行，无需Opti-MEM®或无血清培养液。UltraBio™293F Plus转染试剂转染细胞目的蛋白表达质粒后，通常在48-72小时后达到比较理想的蛋白表达水平。UltraBio™293F Plus转染试剂的转染效率可以通过转染表达EGFP等荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。UltraBio™293F Plus转染试剂为化学合成，因此不含动物源成分(Animal origin-free, AOF)。UltraBio™293F Plus转染试剂转染Expi293F™细胞效果请参考图1。图1.阿拉丁UltraBio™293F Plus转染试剂转染Expi293F™细胞的效果图。如图所示，UltraBio™293F Plus转染试剂与同类转染试剂(Competitor)转染表达EGFP的质粒至Expi293F™细胞，转染48小时后，Expi293F™细胞的荧光照片。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。按照DNA用量(μg)和UltraBio™293F Plus转染试剂(μl)的比例为1:5使用，每毫升UltraBio™293F Plus转染试剂可以转染200μg质粒。4ºC保存，两年有效。长期不使用可以


使用说明：

本使用说明以转染10ml Expi293F™细胞为例。1.接种细胞：转染前一天(18-24小时)根据细胞状态，接种合适的细胞密度(例如100万-150万cells/ml), 使第二天转染时细胞密度达到200万-300万cells/ml。2.准备DNA与Lipo293F™ Plus转染试剂复合物：a.DNA稀释液的配制：对于待转染的10ml Expi293F™细胞，取一个洁净无菌离心管，加入500μl细胞培养液和10μg DNA，并用移液器轻轻吹打混匀。注：使用生理盐水(0.9% NaCl)进行DNA的稀释，可能效果更好。推荐选购阿拉丁的生理盐水(0.9% NaCl, 无菌) 。b.Lipo293F™ Plus转染试剂稀释液的配制：对于待转染的10ml Expi293F™细胞，取一个洁净无菌离心管，加入450-490μl细胞培养液和10-50μl Lipo293F™ Plus转染试剂，并用移液器轻轻吹打混匀。注1：细胞培养液和Lipo293F™ Plus转染试剂总体积为500μl。注2：使用生理盐水(0.9% NaCl)进行DNA的稀释，可能效果更好。推荐选购阿拉丁的生理盐水(0.9% NaCl, 无菌) 。c.DNA与Lipo293F™ Plus转染试剂复合物的配制：将配制好的Lipo293F™ Plus转染试剂稀释液加入到DNA稀释液中，轻轻涡旋混匀或者用移液器轻轻吹打混匀后，室温孵育10-20分钟。注1：推荐DNA用量(μg)和Lipo293F™ Plus转染试剂(μl)的比例为1:1-1:5，因不同的细胞类型和培养条件而有所不同，可以在上述推荐范围内自行优化，摸索**的转染条件。注2：建议采用转染试剂加入到DNA溶液的顺序，效果更佳。d.对于不同体积的细胞培养液，DNA与Lipo293™ Plus转染试剂用量请参考下表，**的转染效果须自行适当优化。 转染体系体积 10ml 20ml 50ml 100ml 200ml 500ml 细胞培养液 0.5ml 1ml 2.5ml 5ml 10ml 25ml DNA 10μg 20μg 50μg 100μg 200μg 500μg 细胞培养液 0.5ml 1ml 2.5ml 5ml 10ml 25ml Lipo293F™ Plus转染试剂 20μl 40μl 100μl 200μl 400μl 1ml 将配制好的Lipo293F™Plus转染试剂稀释液加入到配制好的DNA稀释液中，室温孵10-20分钟 随后加入到培养的悬浮细胞中继续培养24-96小时，后续进行目的蛋白的检测和纯化。 3.转染细胞：a.将1ml DNA与Lipo293F™ Plus转染试剂复合物均匀滴加到10ml Expi293F™细胞中。b.在适宜的温度、湿度和CO2培养条件下，继续培养24-96小时后，即可用适当方式检测转染效果，例如荧光检测、Western、ELISA、报告基因等，或加入适当的筛选药物如G418等进行稳定细胞株的筛选[1]。附录：常用多孔板和培养皿的尺寸、培养面积、细胞培养量和推荐的培养体积等相关数据表： Multiple Well Plates or Dishes Single Well Only for Plates Diameter (Bottom, mm)* Growth Area (cm2)* Average Cell Yield Total Well Volume (ml) Working Volume (ml) Recommended Volume (ml) 6 well 34.8 9.5 9.5 × 105 16.8 1.9-2.9 2 12 well 22.1 3.8 3.8 × 105 6.9 0.76-1.14 1 24 well 15.6 1.9 1.9 × 105 3.4 0.38-0.57 0.5 48 well 11.0 0.95 9.5 × 104 1.6 0.19-0.285 0.25 96 well 6.4 0.32 3.2 × 104 0.36 0.10-0.20 0.1 384 well 2.7 0.056 5.6 × 103 0.112 0.025-0.050 0.030 1536 well 1.63 × 1.63** 0.025 2.5 × 103 0.0125 0.005-0.010 0.010 3.5cm dish 34 9 9.0 × 105 NA 1.8-2.7 2 6cm dish 52 21 2.1 × 106 NA 4.2-6.3 5 10cm dish 8.4 55 5.5 × 106 NA 11-16.5 12 15cm dish 14 152 1.5 × 107 NA 30.4-45.6 35 24.5cm dish 22.4 × 22.4** 500 5.0 × 107 NA 100-150 120 *Diameter and growth area may vary depending on the manufacturer, and the listed sizes are from Corning.**These wells or dishes are square.参考文献：1.Hasebe A, Tashima H, Ide T, Iijima M, Yoshimoto N, et al. Mol Biotechnol. 2012. 51(1):58-66.


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