阿拉丁生产的重组SENPEUH蛋白酶(His-tag)，即Recombinant SENPEUH (His-tag)或rSENPEUH (His-tag)，是一种通过E. coli 重组表达经人工改造的新型SENP蛋白酶，理论分子量为25.7kDa，主要用于切除酵母或真核细胞体系融合表达的重组蛋白的SUMOEU1标签。SUMOEU1标签作为SUMO的突变体，在酵母和真核细胞中可以提高目的蛋白的可溶性和稳定性，而且SUMOEU1标签融合的目的蛋白不参于SUMO相关的细胞调控，也不会被内源性的去SUMO化酶切割，因此SUMOEU1标签适用于酵母和真核细胞重组蛋白的表达和纯化。rSENPEUH高度特异性地识别并切割SUMOEU1标签，实现SUMOEU1标签与目的蛋白的高效分离，切割后的目的蛋白不带有任何相应标签氨基酸的残留1]。本产品N端带有His-tag，可以通过相应的His抗体琼脂糖凝胶、磁珠或镍柱吸附去除。本产品酶切SUMOEU1标签融合蛋白的效果参考图1。图1. 阿拉丁生产的重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) 酶切SUMOEU1-MBP蛋白的效果图。在30μl反应体系中，加入10µg SUMOEU1-MBP及相应量的本品，25℃孵育1小时后，加入7μl SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) ，95℃加热5分钟，使用UltraBio™ Plus PAGE预制胶进行电泳检测，UltraBio™考马斯亮蓝超快染色液进行染色，可以观察到随着重组SENPEUH蛋白酶的酶量增加，SUMOEU1-MBP被酶切的越来越完全。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。本产品的基本信息如下表：rSENPEUH**酶切温度为25℃，在较宽的pH范围(6.0-10.0)、较宽的温度范围(2-37℃)、较宽的离子强度范围(0-1M NaCl，0-500mM Imidazole)内均具有较高的酶活性。在实际操作过程中，建议4℃酶切过夜以尽可能保持重组蛋白的活性。rSENPEUH在0.5-2mM DTT存在的情况下酶活性更高，建议酶切体系中加入适当浓度的DTT以提高酶切效率。 rSENPEUH的酶活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor)如PMSF、AEBSF、Bestatin、Pepstatin、E-4、TLCK和EDTA所抑制。但靶向半胱氨酸(Cysteine)残基的蛋白酶抑制剂如NEM或IAA等，可以显著抑制rSENPEUH的酶活力。本产品用于移除重组蛋白SUMOEU1标签的酶切反应时，如果按照100μg SUMOEU1标签融合的重组蛋白使用1μl rSENPEUH (10U/μl)，并4℃酶切过夜，本产品的500U、2KU、10KU和50KU包装，分别可用于约5mg、20mg、100mg和500mg带有SUMOEU1标签融合重组蛋白的酶切。