稳定性与储存 | 4℃保存,1-2个月有效。切勿置于0℃以下冷冻。 | |||||||||||||||||||||||||||||||
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英文名称 | UltraBio™ EMSA Precast PAGE Gel | |||||||||||||||||||||||||||||||
储存温度 | 2-8°C储存 | |||||||||||||||||||||||||||||||
运输条件 | 冰袋运输 | |||||||||||||||||||||||||||||||
产品介绍 | 阿拉丁的UltraBio™ EMSA PAGE预制胶( UltraBio ™ EMSA Precast PAGE Gel)是一种使用安全、便捷、高品质的常规尺寸聚丙烯酰胺预制凝胶,适用于EMSA (Electrophoretic mobility shift assay)实验。本预制胶有1.5厘米高的浓缩胶,具有非常优良的分离效果,电泳后条带平整、清晰、细腻、锐利,几乎没有边缘效应;同时本预制胶胶板为玻璃材质,减少了对蛋白的非特异性吸附,电泳效果非常好,达到甚至超过了自配EMSA PAGE胶的电泳效果。 拉丁的 UltraBio™ EMSA PAGE预制胶有10孔和15孔两种孔数,4%和6%两种不同浓度的固定浓度胶可供选择。 每种预制胶的参数请参考下表:
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本预制胶含有1.5厘米高的4%浓缩胶,可以有效确保获得非常锐利的条带。
本预制胶丙烯酰胺(Acrylamide)与甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例为29:1,凝胶厚度为1.5mm。加样孔数为10孔的最大上样量为60μl,加样孔数为15孔的最大上样量为30μl。胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm;凝胶尺寸:宽×高×厚度为81×74×1.5mm。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质、核酸及蛋白质-核酸复合物的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验,是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的。
凝胶迁移实验(也称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验) (Electrophoretic mobility shift assay, EMSA),也称Gel Shift,是一种用于蛋白与核酸相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验,也可应用于蛋白-DNA、蛋白-RNA相互作用研究。EMSA技术基于进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时,蛋白质-DNA复合物的迁移速度比游离线性DNA片段慢,从而导致DNA迁移率在与蛋白质结合时减慢。EMSA分辨蛋白质-DNA复合物的能力在很大程度上取决于复合物在实验步骤中的稳定性。电泳缓冲液相对较低的离子强度有助于稳定瞬时相互作用,可以通过该方法分析不稳定的复合物。此外,EMSA也可以解决某些蛋白质因子结合导致的DNA构象改变或弯曲。EMSA不局限于蛋白质与DNA的相互作用,也可用于蛋白质-RNA和蛋白质-蛋白质的相互作用的研究。
EMSA作为研究基因调控和确定蛋白质-DNA相互作用的一项重要技术有如下优点。DNA结合蛋白的来源可以是细胞核或全细胞提取物、体外翻译产物或分离纯化的蛋白;可以定性地用于鉴定裂解物中的序列特异性DNA结合蛋白(如转录因子) [5],并结合相应DNA序列上的点突变来鉴定特定基因上游调控区内的重要结合序列;还可用于定量测量热力学和动力学参数。
阿拉丁的UltraBio™ EMSA PAGE预制胶使用略偏碱性pH的TBE缓冲液制备。
关于10孔和15孔预制胶的选择:需要检测的样品数量多或者需要定量时,推荐使用15孔预制胶,通量更大、更便于进行较多样品的定量统计分析;需要获得非常漂亮的代表性图片时,推荐使用10孔预制胶,10孔预制胶获得的条带更加平整和锐利。
本产品使用安全、便捷。本预制胶无需配制,即开即用,去掉梳子即可上样,而传统的EMSA PAGE配制凝胶繁琐费时,并且制胶时还会接触有毒和刺激性试剂。
本产品质量稳定。本预制胶采用高品质玻璃胶板,和塑料胶板相比,大大减少了胶板对蛋白的吸附,电泳效果更好。
本产品电泳效果好。本预制胶的蛋白质-核酸复合物分离效果极佳,非常适合低丰度蛋白的检测。
本产品电泳时间短。本预制胶最快30分钟即可完成电泳,推荐的电泳电压和电泳时间为100V 30-90分钟,即可完成电泳并获得非常平整和锐利的电泳条带。具体的电泳时间取决于凝胶浓度。
本产品取出凝胶极为便捷。只需用刀片在玻璃胶板一侧轻轻划一下即可,并且玻璃胶板打开极为方便,无需特殊的起撬工具。
注意事项:
本预制胶不能置于0℃以下冷冻,否则凝胶会冻裂。
电泳液建议新鲜配制。试剂纯度不够、反复使用或长期放置的缓冲液会降低电泳效果。电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可能使电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
公司名称:探究者科学器材(江苏)有限公司
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