产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D0343 | BL21-Gold(DE3)甘油菌(蛋白诱导表达兼质粒克隆菌株) | 200μl | 298.00元 |
碧云天生产的BL21-Gold(DE3)甘油菌(BL21-Gold(DE3) Glycerol Stock),是取在对数生长期的BL21-Gold(DE3)菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成,可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株来源于E.coli B,是BL21系列细胞的改进版,可同时用作蛋白表达菌株和质粒克隆菌株,同样适用于T7启动子(T7 promoter)调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒。
BL21-Gold(DE3),具有Hte表型,该表型有效增加了细胞的质粒转染效率;本菌株内的endonuclease I (endA)编码基因失活,可避免endA在大部分质粒小提时对质粒DNA的快速降解,因此本菌株可以产生高质量的小提DNA,直接用于扩增克隆蛋白表达构建质粒。
BL21-Gold(DE3)缺失位于细胞质中的Lon蛋白酶(Lon protease)和胞外膜上的OmpT蛋白酶(OmpT protease),能有效避免重组表达蛋白的降解,被广泛用作外源蛋白的表达菌株。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶启动进行蛋白表达的载体的高效表达菌株。IPTG可以诱导BL21-Gold(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表达,因此BL21-Gold(DE3)菌株适合受T7启动子调控的目的基因通过IPTG诱导表达。在未使用IPTG进行诱导表达时,由于宿主菌内仍然有少量的T7 RNA聚合酶合成,这导致少量的目的蛋白的产生。如果目的蛋白具有毒性,则会抑制细菌生长,甚至导致死亡,因此本菌株不适合表达对细菌有毒性或生长抑制的蛋白。
BL21-Gold(DE3)菌株具有四环素抗性。
BL21-Gold(DE3)菌株基因型:E.coli B F- ompT hsdS(rB- mB- ) dcm+ Tetr gal λ(DE3) endA Hte
BL21-Gold(DE3)菌株核酸酶表达水平较高,在利用其进行被转化质粒提取时,为充分避免核酸酶的影响,可使用碧云天生产的质粒小量抽提试剂盒(通用型) (D0007S或D0007M)、质粒中量抽提试剂盒(通用型) (D0020)或质粒大量抽提试剂盒(通用型) (D0028)进行质粒抽提。
本菌株可以使用常规的LB培养基或2YT培养基进行培养。
关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择,可参考我们的相关网页:http://www.beyotime.com/support/strain.htm
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0343 | BL21-Gold(DE3)甘油菌(蛋白诱导表达兼质粒克隆菌株) | 200μl |
- | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,一年有效。-80℃可以长期保存。
注意事项:使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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