碧云天生产的Origami(DE3)甘油菌(Origami(DE3) Glycerol Stock)，是取对数生长期的Origami(DE3)菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。该菌株是常规重组蛋白表达菌株，适用于T7启动子(T7 promoter)调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒，一般用于含有二硫键的重组蛋白的表达。

Origami系列菌株能够用于氨苄抗性质粒的蛋白表达，尤其是和pET32a载体能够完美搭配使用。pET32a载体含有Thioredoxin (TRX)融合标签，能够高效提升胞质内蛋白二硫键的形成。

为了减少细胞内多种分子间的二硫键的形成，含有Thioredoxin reductase (TrxB)和Glutathione reductase (Gor)基因突变的宿主菌常被建议用于含二硫键正确折叠蛋白的高效表达。Origami系列菌株是大肠杆菌K-12细胞的改进版，对细胞质内二硫化物还原途径的两个酶TrxB和Gor同时突变，使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含有二硫键的活性蛋白的表达和折叠。研究表明使用Origami系列菌株比其他类型表达菌株所表达获得具有活性的二硫键蛋白要多10倍左右。

TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那霉素和四环素抗性，因此本菌株无法用于带有卡那霉素和四环素抗性质粒的蛋白表达。

DE3是溶源性的λDE3，在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。

Origami(DE3)菌株具有卡那霉素、链霉素以及四环素抗性，属于亮氨酸缺陷型菌株。

Origami(DE3)菌株基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsLF′[lac+ lacIq pro] (DE3)gor522::Tn10 trxB (KanR, StrR, TetR)

Origami(DE3)菌株核酸酶表达水平较高，在利用其进行被转化质粒的提取时，为充分避免核酸酶的影响，可使用碧云天生产的质粒小量抽提试剂盒(通用型) (D0007)、质粒中量抽提试剂盒(通用型) (D0020)或质粒大量抽提试剂盒(通用型) (D0028)进行质粒抽提。

本菌株可以使用常规的LB培养基或2YT培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/strain.htm

-20℃保存，一年有效。-80℃可以长期保存。

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。