碧云天生产的Rosetta(DE3)超级感受态细胞，英文名Rosetta(DE3) Super Competent Cells，是一种兼容真核生物6种稀有密码子进而实现重组真核蛋白表达的E. coli. Rosetta(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化，在严格按照使用说明进行操作时，转化效率可以达到1.0±0.5×10⁸cfu/μg DNA。

BL21是一种缺失内源性蛋白酶的大肠杆菌B菌株，它能有效避免重组表达蛋白的降解，广泛用于重组蛋白的表达。BL21(DE3)是被λ噬菌体DE3溶原化所得BL21衍生菌株。噬菌体DE3中的T7 RNA聚合酶受到lacUV5启动子控制。外源添加IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的快速表达。T7 RNA聚合酶进而识别表达质粒载体上的的T7启动子，从而驱动重组蛋白的高效表达。因此BL21(DE3)菌株适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统，比如常见的原核表达载体pET系列[1]。

Rosetta是在大肠杆菌BL21(DE3)基础上携带额外质粒所得衍生菌株。该质粒含有一个氯霉素抗性基因且可转录产生识别6种大肠杆菌的稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)的tRNA(这些tRNA是由它们天然的启动子驱动转录的)，因此Rosetta能够大大提高带有真核基因特异的稀有密码子的真核基因在大肠杆菌中的表达水平。

Rosetta(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdS_B(r_B^-, m_B^-) gal dcm(DE3) pRARE(argU, argW, ilex, glyT, leuW, proL) (Cam^R)。

-80℃保存，一年内有效。避免反复冻融，通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。

感受态细胞禁止反复冻融，并应尽可能避免冻融，反复冻融会导致转化效率大幅下降。

感受态细胞融化后，须尽快加入待转化样品，不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间，以免降低感受态细胞的转化效率。

待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%，样品体积过大会导致转化效率下降。

感受态细胞对于温度变化非常敏感，需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。

感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作，不能使用移液枪吹打混匀。

通常仅建议取部分样品用于转化，这样万一遇到转化失败的情况，还留有样品可以再次进行转化。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。