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  • 2×Super Kfx MasterMix (Dye)
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  • 2×Super Kfx MasterMix (Dye)

    实验室试剂
    阿拉丁
    0-2000
    • ¥447.90-1797.90
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


别名

阿拉丁S665699


高保真酶预混液 | 2×Super Kfx MasterMix(染料)

英文名称2×Super Kfx MasterMix (Dye)
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

产品内容 

S665699Component1 mL5 mLStorage
S665699A2×Super Kfx MasterMix (Dye)1 mL 5×1 mL -20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
S665699BddH2O1 mL5×1 mL  
-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品简介 

本品为由Super Kfx DNA Polymerase、Mg2+ 、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组 成的预混体系,浓度为2×。Super Kfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高 保真DNA聚合酶,该酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,具有扩增能力 强,保真度高,特异性强等优点。2×Mix中添加了独特的扩增增强因子及延伸因子,独 特的配方使整个反应体系非常稳定,操作方便,适用于各种片段及模板的扩增。本产 品适用于基因克隆、二代建库扩增、基因定点突变、SNP等扩增实验。本产品已加入 染料(蓝色),反应结束后可直接进行琼脂糖电泳检测,操作方便简单。

 质量控制

  经检验无外源核酸酶活性,无宿主残留DNA,能有效地扩增各种模板。 

使用方法

  以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的改进和优化。 

1. PCR 反应体系 

所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分混匀,用完之后请及时放回-20℃ 保存。

 

试剂

50 μL反应体系

终浓度

2×Super Kfx MasterMix(Dye)

25 μL

Forward Primer,10 μM

2 μL

0.4 μM

Reverse Primer,10 μM

2μL

0.4 μM

Template DNA 适量

适量

<500 ng/50 μL

ddH2O

up to 50 μL



2. PCR 反应条件 

步骤 

温度

时间


预变性 

98°C

30s-3min


变性 

98°C

10-30s

25-35循环

退火 

根据引物Tm定

15-30s

25-35循环

延伸 

72°C

4-6kb/min

25-35循环

终延伸

72°C

5min



注意: 

1)优先使用三步法扩增,三步法无法扩增目的产物或引物Tm值大于68°C,请尝试两步法。 

2)变性:简单模板的预变性98℃,30s-1min,对于复杂的模板,预变性时间可延长至3min。 

3)退火:一般实验中退火温度比引物的Tm值低3-5℃,如无法得到理想的扩增效率时,应梯度改变 退火温度,进行优化;发生非特异性反应时,适当提高退火温度。 

4)延伸:延伸时间应根据所扩增片段的长度和模板复杂程度设定,本产品扩增效率为4-6 kb/min, 对于长片段及复杂性高的模板建议2-4 kb/min。 

5)循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数,如果循环次数太少,扩增量不足,循环次数 太多,错配机率会增加,所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

Product content

S665699Component1 mL5 mLStorage
S665699A2×Super Kfx MasterMix (Dye)1 mL 5×1 mL -20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
S665699BddH2O1 mL5×1 mL  
-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.


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