品牌货号 别名 | 阿拉丁S665699 高保真酶预混液 | 2×Super Kfx MasterMix(染料) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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英文名称 | 2×Super Kfx MasterMix (Dye) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
储存温度 | -20°C储存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
运输条件 | 超低温冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品介绍 | 产品内容
产品简介 本品为由Super Kfx DNA Polymerase、Mg2+ 、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组 成的预混体系,浓度为2×。Super Kfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高 保真DNA聚合酶,该酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,具有扩增能力 强,保真度高,特异性强等优点。2×Mix中添加了独特的扩增增强因子及延伸因子,独 特的配方使整个反应体系非常稳定,操作方便,适用于各种片段及模板的扩增。本产 品适用于基因克隆、二代建库扩增、基因定点突变、SNP等扩增实验。本产品已加入 染料(蓝色),反应结束后可直接进行琼脂糖电泳检测,操作方便简单。 质量控制 经检验无外源核酸酶活性,无宿主残留DNA,能有效地扩增各种模板。 使用方法 以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的 片段大小不同进行相应的改进和优化。 1. PCR 反应体系 所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分混匀,用完之后请及时放回-20℃ 保存。
2. PCR 反应条件
注意: 1)优先使用三步法扩增,三步法无法扩增目的产物或引物Tm值大于68°C,请尝试两步法。 2)变性:简单模板的预变性98℃,30s-1min,对于复杂的模板,预变性时间可延长至3min。 3)退火:一般实验中退火温度比引物的Tm值低3-5℃,如无法得到理想的扩增效率时,应梯度改变 退火温度,进行优化;发生非特异性反应时,适当提高退火温度。 4)延伸:延伸时间应根据所扩增片段的长度和模板复杂程度设定,本产品扩增效率为4-6 kb/min, 对于长片段及复杂性高的模板建议2-4 kb/min。 5)循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数,如果循环次数太少,扩增量不足,循环次数 太多,错配机率会增加,所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 Product content
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