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  • SuperPro Multiplex PCR Mix
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  • SuperPro Multiplex PCR Mix

    实验室试剂
    阿拉丁
    0-2000
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


别名

阿拉丁S666084


SuperPro 多重 PCR 混合物

规格或纯度1ml
英文名称SuperPro Multiplex PCR Mix
储存温度-20°C储存,避免反复冻融
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

产品内容

S666084Component1 mLStorage
S666084A2.5×SuperPro Multiplex PCR Mix1 mL -20°C. Avoid freeze/thaw cycle.
S666084BddH₂O1 mL -20°C. Avoid freeze/thaw cycle.

产品简介

SuperPro Multiplex PCR Mix是一款适用于各种类型多重PCR的预混体系,浓度为 2.5×,包含DNA聚合酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg²+以及稳定剂和增强剂等成分,本 品只需要加入引物和模板即可进行扩增,操作简单方便,减少了污染几率,提高了检 测通量和重现性。

SuperPro Multiplex PCR Mix包含的DNA聚合酶是一种经基因工程改造的重组酶, 具有5’→3’DNA聚合酶活性,无5’→3’外切酶活性;DNA聚合酶经过新型抗体修饰,为 抗体修饰热启动酶,能够有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二 聚体而产生的非特异性扩增,同时具有激活时间短、扩增能力强、灵敏度高、稳定性 好等优良特点。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率, 灵敏度更高,抑制物耐受性更强。

SuperPro Multiplex PCR Mix应用范围广,适用于各种类型多重PCR,如微卫星分 析、扩增子建库、基因分型以及SNP检测等。  

注意事项

1.使用前请在本品完全融化后上下颠倒轻轻混匀,并经短暂离心后使用。 

2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本品可置于-20℃长期保存

使用方法

1. PCR反应体系 

提取DNA扩增反应体系:


试剂

25 μL体系

50 μL体系

终浓度

2.5×SuperPro Multiplex PCR Mix

10 μL

20 μL

5×Primer Mix

5 μL

10 μL

 

Template DNA

X μL

X μL


ddH2O

Up to 25 μL

Up to 50 μL



注意: 引物设计时,应尽量减小各引物的Tm间的差值,差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以终浓度 0.05-0.2 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物浓度;发

2. PCR反应程序

步骤

温度

时间

循环

预变性

95℃

2 min

 

1

变性

95℃

10 s

 

30-40

 

退火

55-65℃

30 s

 

30-40

 

延伸

72℃

1 kb/min

 

30-40

 

终延伸

72℃

5 min

 

1

注意: 

1) 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火 温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。 

2) 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配 机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 

3) PCR产物极易产生气溶胶污染,进而导致实验结果不准确、可信度不高等问题。建议将PCR反应体系 配制区和PCR反应区进行物理隔离,使用专用的移液器等设备,并定时对各实验区域进行清洁(使用 0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理),以保证实验结果的可信度。


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