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  • 2xTaq MasterMix
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  • 2xTaq MasterMix

    实验室试剂
    阿拉丁
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  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


规格或纯度

阿拉丁T665852


用于聚丙烯酰胺凝胶电泳

英文名称2xTaq MasterMix
储存温度-20°C储存,避免反复冻融
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍
T665852Component5 mLStorage
T665852A2×Taq MasterMix (for PAGE)5×1 mL-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T665852BddH₂O5×1 mL-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

注意：2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400 µM each dNTP。

产品简介：

2×Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs、PCR稳定剂和增强 剂组成的预混体系。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，并可最大限度地减少 人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高，重复性强，稳定性好。本 品不含染料，PCR程序结束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。扩增 得到的PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩 增DNA、DNA序列测定等实验，PCR扩增产物专用于聚丙烯酰胺凝电泳检测。  

质量控制：

经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增多种基 因组中的单拷贝基因。

使用方法：

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。  

1. PCR反应体系  

试剂50 μl反应浓度终浓度
2×Taq MasterMix（for PAGE）25 μl1×
Forward Primer，10 µM2 μl0.4 μM
Reverse Primer，10 µM2 μl0.4 μM
Template DNA<0.5 μg<0.5 μg/50 μl
ddH2Oup to 50 μl/
注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高 引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2. PCR反应条件

步骤温度时间/
预变性94℃2 min/
变性94℃30 s25-35 个循环
退火55-65℃30 s25-35 个循环
延伸72℃30 s25-35 个循环
终延伸72℃2 min/

注意：

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时，适当降 低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足； 如果循环次数太 多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


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