阿拉丁研发生产的Bst 6.0 DNA Polymerase，是一种Bst DNA Polymerase, large fragment 的同源蛋白，即嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus, Bst) DNA聚合酶大片段的同源蛋白，和Bst DNA Polymerase大片段相比，具有更强的5′→3′DNA聚合酶活性、更强的链置换能力、dUTP耐受性、耐盐性以及非离子去垢剂耐受性。Bst 6.0 DNA Polymerase不具有5′→3′和3′→5的核酸外切酶活性，可应用于环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)、交叉引物扩增技术(Crossing priming amplification, CPA)、滚环扩增(Rolling-circle amplification, RCA)和基于滚环扩增的等温扩增反应等。Bst 6.0 DNA Polymerase介导的等温扩增温度一般在50-68ºC之间，通常为65ºC，**温度与所使用的引物和扩增的产物有关，需要通过实验进行优化。活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 65°C。阿拉丁生产的Bst 6.0 DNA Polymerase酶活性效果参考图1。图1. 阿拉丁Bst 6.0 DNA Polymerase 进行环介导等温扩增反应的效果图。在25μl体系，以相同量(0.1ng)的pCMV-Cre-EGFP 为模板，使用不同量的阿拉丁的本产品或N公司(Competitor)的Bst 2.0 DNA polymerase，引物：1.6µM FIP/BIP，0.2µM F3/B3，0.4µM Loop F/B，1.4mM dNTP each，在1X Bst 6.0 Reaction Buffer (2mM MgSO4)中补加MgSO4至终浓度为8mM，65ºC孵育1小时，80ºC加热20分钟灭活，然后进行2.0%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与Competitor N公司的产品相比，具有相当的酶活性效果。-, 仅未添加酶的阴性对照；+, 仅未添加模板的阴性对照; M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) )。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。阿拉丁生产的Bst 6.0 DNA Polymerase进行环介导等温扩增反应可耐受高浓度的dUTP参考图2。图2. 阿拉丁Bst 6.0 DNA Polymerase 进行环介导等温扩增反应的高dUTP耐受性的效果图。在25μl体系，以相同量(0.1ng)的pCMV-Cre-EGFP 为模板，使用不同量的本产品或N公司(Competitor)的Bst 2.0 DNA Polymerase，引物：1.6µM FIP/BIP，0.2µM F3/B3，0.4µM Loop F/B，1.4mM dNTP each，1.4mM dUTP，0.04U UDGase，在1X Bst 6.0 Reaction Buffer (2mM MgSO4)中补加MgSO4至终浓度为8mM，65ºC孵育1小时，80ºC加热20分钟灭活，然后进行2.0%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与Competitor N公司的产品相比，具有类似的高dUTP耐受性。-, 仅未添加酶的阴性对照；+, 仅未添加模板的阴性对照; M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) )。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。阿拉丁生产的Bst 6.0 DNA Polymerase进行环介导等温扩增反应可耐受高浓度的非离子去垢剂参考图3。图3. 阿拉丁Bst 6.0 DNA Polymerase 进行环介导等温扩增反应的高非离子去垢剂耐受性的效果图。在25μl体系，以相同量(0.1ng)的pCMV-Cre-EGFP 为模板，使用相同量的本产品或N公司(Competitor)的Bst 2.0 DNA Polymerase，引物：1.6µM FIP/BIP，0.2µM F3/B3，0.4µM Loop F/B，1.4mM dNTP each，5%非离子去垢剂（A, Tween-20; B, NP-40; C, TritonX-100），在1X Bst 6.0 Reaction Buffer (2mM MgSO4)中补加MgSO4至终浓度为8mM，65ºC孵育1小时，80ºC加热20分钟灭活，然后进行2.0%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与Competitor N公司的产品相比，具有类似对非离子洗涤剂的高耐受性。-, 仅未添加酶的阴性对照；+, 仅未添加模板的阴性对照; M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) )。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。阿拉丁生产的Bst 6.0 DNA Polymerase进行环介导等温扩增反应可耐受高浓度的钾离子(K+)参考图4。图4. 阿拉丁Bst 6.0 DNA Polymerase 进行环介导等温扩增反应的耐盐性(K+)效果图。在25μl体系，以相同量(0.1ng)的pCMV-Cre-EGFP 为模板，使用不同量的本产品或N公司(Competitor)的Bst 2.0 DNA Polymerase，引物：1.6µM FIP/BIP，0.2µM F3/B3，0.4µM Loop F/B，1.4mM dNTP each，在1X Bst 6.0 Reaction Buffer (2mM MgSO4)中补加MgSO4至终浓度为8mM，同时补加KCl至终浓度为10mM、50mM或100mM，65ºC孵育1小时，80ºC加热20分钟灭活，然后进行2.0%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与Competitor N公司的产品相比，具有类似的耐盐性(K+)。-, 仅未添加酶的阴性对照；+, 仅未添加模板的阴性对照; M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) )。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。

用途：

来源：

酶储存溶液：

失活或抑制：

注意事项：

使用说明：