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  • 2×常规PCR预混液
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  • 2×常规PCR预混液

    实验室试剂
    阿拉丁
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  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


规格或纯度

阿拉丁T295072


2×

英文名称Taq-Plus PCR Master Mix (2x)
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

Taq-Plus PCR Master Mix (2x) 的浓度为 2×，使用方便快捷，能减少 PCR 操作过程中的污染，使用时只需取适量 Taq-Plus PCR Master Mix (2x)，加入模板和引物，并加入 ddH2O 补足体积，使反应体系浓度为 1× 即可进行 PCR 反应。 该 Mix 最长可扩增 5 kb DNA 片段，具有良好的扩增特异性和模 板兼容性，PCR 产物 3' 端带 A 碱基，纯化后可直接用于 T/A 克隆。


使用方法

1. 常规 PCR 反应体系


a. 引物推荐终浓度为0.2~0.4μM，效果不佳时可以在0.1~1μM 浓度范围内进行调整；

b. 不同模板**反应浓度有所不同，以 50μl体系为例：模板为基因组 DNA 时， 一般推荐的使用量为10~400ng；当模板为质粒或病毒DNA时，一般推荐的使用量为

10pg~20ng。

2. 常规 PCR 反应程序


a. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应，对于一些复杂模板，例如：菌液、菌落（尤其是酵母）的PCR 扩增，预变性时间可适当延长至10 min，以提高预变性效果；

b. 关于延伸速率，当目的片段长度不超过 2 kb 时，推荐使用30 sec/kb；当目的片段长度大于 2 kb 时，推荐使用 60 sec/kb。

注 : 如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板，建议目的片段长度不超过 2.5 kb，若 超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。


质量控制

核酸内切酶残留检测：将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃温育 4 h，通过 DNA 电泳检测质粒无变化。

核酸外切酶残留检测：将酶液与双链 DNA 底物在 37℃温育 16 h，通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。

稳定性测试：室温存放一周，无明显活性改变。

功能检测：以质粒 DNA 和人基因组 DNA 为模板，扩增 5k 和 3k 两个片段， 30 个循环后经琼脂糖凝胶电泳检测可见目的条带。


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备注：无质量问题不做退换货处理，下单前请仔细确认，感谢配合！