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  • Universal miRNA Cloning Linker (5´腺苷化3´封闭)
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  • Universal miRNA Cloning Linker (5´腺苷化3´封闭)

    实验室试剂
    阿拉丁
    2000-5000
    • ￥494.90-2004.90
      ￥0.00
      ￥494.90-2004.90
      ￥296.94-1202.94

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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:2000-5000
商品描述


品牌货号


稳定性与储存

阿拉丁U751650


-20℃保存，一年有效。-80℃保存，至少一年有效。

英文名称Universal miRNA Cloning Linker (5′ adenylated, 3′ blocked)
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

阿拉丁生产的Universal miRNA Cloning Linker (5´腺苷化3´封闭)，即通用miRNA克隆接头(5´腺苷化3´封闭)或Universal miRNA Cloning Linker (5'adenylated, 3'blocked)，是一种常用于miRNA等3'端为羟基的RNA或3'端为羟基的单链DNA在克隆、高通量测序建库或PCR检测等时，在3'端添加的接头。本产品5´端腺苷酰化(也称5´端预腺苷酰化或5´端预腺苷化，5′ pre-adenylated或5′ pre-adenylation)，3´端氨基封闭，可以用于3'端为羟基的RNA的3'端接头的添加。RNA连接酶可以识别“活化”的5´端腺苷酰化的本产品，在无需ATP存在的条件下，可将本产品的5´端与另外一条单链寡核苷酸的3´端羟基共价连接。利用5´端腺苷酰化，3´端封闭的本产品，加入RNA连接酶，在无需添加ATP的条件下，就能实现本产品5'端和目标序列3'羟基的特异性共价连接。例如和miRNA连接时，可以有效避免miRNA的自连、不同miRNA之间的连接、本产品的自连或本产品不同链之间的连接，而仅发生本产品5'端和miRNA 3'羟基之间的特异性连接。本产品的电泳图和连接效果图请参考图1。图中可见，本产品条带清晰，纯度高，与5'端为磷酸化的序列相比有显著的电泳迁移率差异(图1A)；并且本产品使用"T4 RNA ligase 2 , truncated与ssRNA连接时，连接效率非常高(图1B)。图1. Universal miRNA Cloning Linker Linker (5´腺苷化3´封闭)及其连接效果图图。图A. 本产品5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´ (AppDNA)与5´-pCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´ (pDNA)的电泳对比图。图B. 本产品(AppDNA)与ssRNA使用T4 RNA ligase 2 , truncated的连接效果图。图中可见本产品与ssRNA有非常高的连接效率。本产品的寡核苷酸序列是：5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT–NH2-3´。本产品的序列同NEB公司的S1315S Universal miRNA Cloning Linker。本产品以水溶液的形式存在，浓度为40ng/µl，即6.9µM。


用途：

本产品可以应用于小RNA克隆、miRNA文库构建。本产品的1µg小包装约通常可以进行8-17次连接反应，5µg中包装约通常可以进行40-85次连接反应。具体的连接反应次数和反应体系的体积和本产品的用量有关。


注意事项：

本产品4ºC保存时应避免靠近冰箱壁，以免局部温度过低导致沉淀析出。如果有沉淀析出，室温摇晃片刻，再放置在4ºC冰箱过夜或更长时间，待沉淀消失后再使用。本产品一般适用于293细胞悬浮培养，不推荐用于没有经驯化过的贴壁293细胞的培养。使用本产品应注意无菌操作，避免污染。一般不建议补充抗生素，以免影响细胞的正常生长速度，但如果不能再高洁净度细胞培养室内操作，仍需加入适量的抗生素。若使用过程中发现培养液浑浊、沉淀等异常现象，则不能继续使用。本产品中已添加的L-谷氨酰胺(约6mM)是细胞培养所必需的营养成分，一般无需额外再添加，否则可能产生细胞毒性。但L-谷氨酰胺在溶液中不太稳定、易分解，若本培养液长期放置后再使用，发现细胞生长变慢，可在使用前加入适量的L-Glutamine (100X) 或可以稳定保存的L-Ala-Gln (100X) ，以维持细胞的正常生长代谢。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。



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