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  • E. coli DNA Ligase
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  • E. coli DNA Ligase

    实验室试剂
    阿拉丁
    2000-5000
    • ￥252.90-3894.90
      ￥0.00
      ￥252.90-3894.90
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:2000-5000
商品描述


品牌货号


别名

阿拉丁E745500


大肠杆菌 DNA 连接酶

规格或纯度不含除E. coli DNA Ligase之外的其它种类的DNA连接酶，不含内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷酸酯酶。
稳定性与储存-20℃保存，两年有效。
英文名称E. coli DNA Ligase
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

阿拉丁生产的E. coli DNA Ligase，即大肠杆菌DNA连接酶，由阿拉丁自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组酶。E. coli DNA Ligase是一种以NAD+ (烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)为辅酶，Mg2+', "依赖的，催化双链DNA中5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键，即催化双链DNA粘性末端连接或双链DNA中的缺刻修复的DNA连接酶1]。E. coli'DNA Ligase可催化双链DNA相邻粘性末端5'磷酸和3'羟基磷酸二酯键的形成，但常规条件下不能进行平末端双链DNA的连接。在添加10-15% PEG和适当高浓度的单价阳离子时，也可以催化平末端双链DNA的连接反应。"E. coli DNA Ligase在一定温度范围内(4-37℃)均具有活性，同时可以被热失活(65℃孵育20分钟)。阿拉丁生产的E. coli DNA Ligase连接粘性末端双链线性DNA的效果请参考图1：图1. 阿拉丁生产的E. coli DNA Ligase连接粘性末端双链线性DNA的效果图。利用阿拉丁生产的EnzymoPure™ DNA Polymerase ，使用两端带有Hind III酶切位点的引物对靶基因进行PCR扩增，生成两种不同长度的两端带有HindⅢ酶切位点的平末端双链线性DNA分子(900bp和600bp)，随后使用阿拉丁Hind III 对PCR产物进行酶切，获得两端带有互补粘性末端的双链线性DNA分子，分别作为Substrate 1 (900bp)和Substrate 2 (600bp)；在20µl反应体系(30mM Tris-HCl, 4mM MgCl2, 1mM DTT, 26μM NAD, 50μg/ml BSA, PH8.0 @25℃)中，分别加入400ng经PCR扩增及Hind III酶切产生的两种双链DNA片段，以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的E. coli DNA Ligase，16℃孵育30分钟进行连接，然后65℃孵育20分钟以终止反应。取出10μl反应产物，加入2μl 6X DNA Loading Buffer ，然后进行2%琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有相当的连接粘性末端双链线性DNA的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。


用途：

粘性末端双链DNA分子的连接；双链DNA的缺刻修复；cDNA第二链合成后的克隆[2]。


来源：

纯化自携带编码E. coli DNA ligase的E. coli重组菌株。


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