阿拉丁生产的E.coli'DNA Polymerase I，即大肠杆菌DNA聚合酶I，是由阿拉丁自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种DNA模板依赖的DNA聚合酶，可以在单链DNA模板和与其配对的引物存在的条件下，催化5'→3'方向的DNA合成1]。"E.coli'DNA Polymerase I同时还具备双链DNA缺刻(nick)处特异性的5'→3'外切酶活性、单链特异性的3'→5'外切酶活性以及核糖核酸酶H活性2]。"E.coli'DNA Polymerase I的DNA合成酶活性和双链DNA缺刻(nick)处特异性的5'→3'外切酶活性，可以实现缺刻处3'-OH起始的DNA合成和5'端单链DNA的降解，实现缺口平移。"E.coli'DNA Polymerase I的单链特异性的3'→5'外切酶活性可以起到DNA合成的校验作用(proofreading)。在有dNTP存在的情况下，"E.coli DNA Polymerase I更多地表现为DNA聚合酶活性；而当dNTP不存在的情况下，E.coli'DNA Polymerase I更多表现为单链特异性的外切酶活性，例如可以表现为平末端双链DNA中的任一条链的5'端的5'→3'外切酶活性。E.coli DNA Polymerase I的多功能性可实现以双链DNA中的缺刻或缺口为起点合成新的DNA链；从缺口处降解与模板链互补的DNA链，实现DNA的缺口平移；保证DNA复制过程中错配的校对，并对复制和修复中出现的空隙进行填补3]。阿拉丁生产的E.coli'DNA Polymerase I补平双链DNA 5'突出末端(5' overhang)的效果参考图1。图1. 阿拉丁生产的E.coli DNA Polymerase I 补平双链DNA 5'突出末端(5' overhang)的效果图。在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的"E.coli DNA Polymerase I，37ºC孵育20分钟进行反应，反应完成后75ºC孵育20分钟以终止反应。取出5μl反应产物，加入1μl 6X DNA Loading Buffer ，然后进行15%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。180V电泳60分钟，之后用Gel-Red (EB升级换代产品，10000X) 室温染色5分钟，在紫外灯下观察实验结果。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的催化效果。反应体系(20µl): 10mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 10mM MgCl2, 1mM DTT, 100µM dNTP Mix, 0.5µM dsDNA with 5' overhang (pH7.9 @ 25ºC)。dsDNA with 5' overhang (也称具有5'突出末端的双链线性DNA)是使用Annealing Buffer for DNA Oligos (5X) ("D0251', ")并按照该产品说明书推荐的程序，把5'-ATACATAGATACATAGACTGGCCGTCGTTTTAC-3'和5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'这两条寡核苷酸链进行退火反应得到的产物，并以此退火产物为底物，进行双链DNA 5'突出末端的补平。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。阿拉丁生产的E.coli'DNA Polymerase I对3'端带有氨基修饰的双链线性DNA消化(5'→3'外切酶活性)的效果参考图2。图2. 阿拉丁生产的E.coli DNA Polymerase I 对3'端带有氨基修饰的双链线性DNA消化(5'→3'外切酶活性)的效果图。在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的"E.coli DNA Polymerase I，37ºC孵育20分钟进行反应，反应完成后75ºC孵育20分钟以终止反应。取出5μl反应产物，加入1μl 6X DNA Loading Buffer ，然后进行15%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。180V电泳60分钟，之后用Gel-Red (EB升级换代产品，10000X) 室温染色5分钟，在紫外灯下观察实验结果。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的催化效果。反应体系(20μl)：10mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 10mM MgCl2, 1mM DTT, 0.5µM dsDNA。3'端带有氨基修饰的单链DNA不会被"E.coli'DNA Polymerase I 的3'→5'外切酶活性所降解。3'端带有氨基修饰的dsDNA是使用Annealing Buffer for DNA Oligos (5X) ("D0251', ")并按照该产品说明书推荐的程序，把5'-ATACATAGATACATAGACTGGCCGTCGTTTTAC-3'NH2和5'-GTAAAACGACGGCCAGTCTATGTATCTATGTAT-3'NH2这两条寡核苷酸链进行退火反应得到的产物，并以此退火产物为底物，进行双链线性DNA消化。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。

用途：

来源：

酶储存溶液：

失活或抑制：

注意事项：