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  • T7 Endonuclease I (CRISPR等基因突变鉴定用)
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  • T7 Endonuclease I (CRISPR等基因突变鉴定用)

    实验室试剂
    阿拉丁
    0-2000
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


规格或纯度

阿拉丁T750878


≥95%, 不含T7EI之外的DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷酸酯酶。

稳定性与储存-20℃保存,至少一年有效。
英文名称T7 Endonuclease I
单位定义One unit is defined as the amount of enzyme required to convert > 90% of 1 μg of supercoiled cruciform pUC(AT) to > 90% linear form in a total reaction volume of 50 μl in 1 hour at 37℃。10X Reaction Buffer:500 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 10 mM
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

阿拉丁生产的T7 Endonuclease I ,即T7核酸内切酶I,是一种比较特殊的DNA内切酶,能识别并切割不完全配对的DNA(non-perfectly matched DNA)、十字型结构DNA(cruciform DNA structures)、Holliday结构或交叉DNA(Holliday structures or junctions)和异源双链DNA(heteroduplex DNA)。T7EI切割的位点位于错配碱基5’端的**、第二或第三个磷酸二脂键。此外,T7EI也能以很慢的速度切割含有缺刻的双链DNA(nicked double-stranded DNA)。本产品常用于CRISPR/Cas9等导致的基因突变的鉴定。T7EI切割错配碱基位点的活性如图1所示。需要特别注意的是T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识1bp的插入、缺失或突变。


用途:

T7EI常用于CRISPR/Cas9、TALEN或以及其它基因编辑工具形成的突变体检测,也常用于基因点突变和SNP的检测,也可以用于分解四方向交叉DNA(four-way junction)或分支DNA(branched DNA)、检测或切割异源双链DNA和缺刻DNA(heteroduplex and nicked DNA),以及随机切割线性DNA(借助线性DNA分子内或分子间部分配对形成的不完全匹配双链DNA)用于进行鸟枪法(Shot-gun)克隆和测序等。


来源:

大肠杆菌表达的T7噬菌体基因3的重组蛋白。


失活或抑制:

85℃加热15min或加入EDTA至终浓度20mM可以使T7EI失活。


注意事项:

T7EI是一种依赖于底物结构并进行选择性酶切的酶,其对不同的DNA底物显示出不同的反应活性。因此,切割特定底物时,必须控制好酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加其非特异性酶切的活性;而反应温度超过55℃则会降低其酶活性。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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