| T751065 | Component | 200 U | 1000 U | Storage | | T751065A | Thermostable RNase H | 200 U | 5×200 U | -20°C. Avoid freeze/thaw cycle | | T751065B | 10× RNase H Reaction Buffer | 1 mL | 5×1 mL | -20°C. Avoid freeze/thaw cycle |
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储存缓冲液：500mM Tris-HCl, 750mM KCl, 100mM DTT, 30mM MgCl2, pH 8.3, 25°C Thermostable RNase H，耐热 RNase H，是一种在较高温度(65°C以上)时仍然保持活性的核糖核酸内切酶(endoribonuclease)。Thermostable RNase H可以选择性识别并酶切 RNA:DNA 杂合双链中的 RNA 链，同时杂合双链中的 DNA 会保持完整。ThermostableRNase H 不会降解单链或双链的 RNA 或 DNA。 产品应用 1、高精度 RNA 结构图谱制备和 mRNA 加帽率分析。 2、cDNA 第二链合成中去除 mRNA;提高 RT-qPCR 效率。 3、在 Oligo(dT) 存在下除去 mRNA 的 Poly(A) 末端。 4、等温扩增实验中的组份。 活性定义 以 40 pmol 荧光标记的 25 bp RNA:DNA 杂交体为底物，在 50 μl反应体系中，50°C条件下，20 分钟内产生1nmol 核糖核苷酸所需的酶量定义为1个活性单位(U)。 质量控制 1、非特异性内切酶活性检测 将5 U的本酶与超螺旋质粒 DNA 在 37°C温育 4 h，通过 DNA 电泳检测质粒无变化。 2、DNase 残留检测 将5 U本酶与双链 DNA 底物在 37°℃温育 16 h，通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。 3、RNase 残留检测 将5 U的本酶与 500 ng RNA 在 37°C温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过 90% 的 RNA 仍保持完整。 4、宿主 DNA 残留检测 本品中大肠杆菌宿主细胞 DNA 残留量低于 10 拷贝 /5 U。 注意事项 1、Thermostable RNase H反应缓冲液包含 MgCl2。目标 RNA:DNA杂交体和其它单链 RNA(总 RNA)在高温下使用 ThermostableRNase H时，建议控制反应时间和温度，以降低金属离子的单链RNA 的降解。 2、Thermostable RNase H可以通过添加蛋白酶K或过量的 EDTA来失活。 3、**反应温度 >65°℃，最高 95°℃。Thermostable RNase H在 65°C时的活性是 37°C时的 3 到 4倍。4.为了您的安全和健康，请穿实 | 
