品牌货号:阿拉丁W751789
产品名称 | WELQ Protease |
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别名 | WELQ蛋白酶 |
规格或纯度 | 5U/μl |
产品介绍 | 阿拉丁生产的WELQ Protease,也称WELQut Protease、WELQ蛋白酶或WELQut蛋白酶,是阿拉丁自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组蛋白酶。WELQ蛋白酶能特异性地识别四肽序列Trp-Glu-Leu-Gln (W-E-L-Q),并对Gln (Q)之后的肽键进行酶切,常用于重组蛋白除去His或者其它融合标签,其最突出优势是酶切后不会在目的蛋白的N端留下任何额外的氨基酸残基。本WELQ蛋白酶反应条件比较宽泛。WELQ蛋白酶是一种源自金黄色葡萄球菌的丝氨酸蛋白酶类似蛋白(Serine protease-like proteins) 1,2],该蛋白酶反应时不需要特殊的反应缓冲液,能在比较宽泛的温度区间(4-30℃)及pH区间(6.5-9.0)识别WELQ多肽序列,并在Gln (Q)之后进行蛋白或多肽的剪切。本WELQ蛋白酶能适用于His标签蛋白的柱上酶切。本WELQ蛋白酶带有His标签,特别适用于His标签蛋白的柱上酶切。在切割His标签蛋白的时候,切下的His标签和WELQ蛋白酶可结合于His纯化柱(His-tag Purification Resin)上,而目的蛋白在穿透液中,这样洗脱下来的蛋白中理论上就不会含有His标签和WELQ蛋白酶,极大地方便了目的蛋白的纯化。如果不进行柱上酶切,分别过镍柱和能除去目的蛋白融合标签的纯化柱也可以方便地去除WELQ蛋白酶和目的蛋白上切割下来的标签。阿拉丁的WELQ Protease活性鉴定结果可参考图1。,图1. 阿拉丁的WELQ Protease 与T公司同类产品(Competitor)切割GST标签融合蛋白(WELQ四氨基酸序列位于GST和10kD目的蛋白之间)的效果图。将含有WELQ Protease识别位点的36kD GST标签融合蛋白与WELQ Protease进行反应,底物的用量为50μg,酶的用量分别为1U和2U,在50mM Tris-HCl (pH8.0)的缓冲液中反应,设置4℃与25℃两种反应温度,在反应0、1、3、6小时以及过夜(Overnight, O/N) (超过16小时)后取样,进行SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色。酶切产物大小为约10kD的目的蛋白和约26kD的GST标签。如图所示,本产品与T公司(Competitor)的WELQ蛋白酶具有相当的活性。实际效果会因样品种类、检测条件等不同而存在差异,本图仅供参考。WELQ Protease分子量大小约22kDa,纯度≥95%。不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷酸酯酶。 |
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