产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D1029S | DH10Bac超级感受态细胞 | 10×100μl | 288.00元 |
D1029M | DH10Bac超级感受态细胞 | 50×100μl | 1058.00元 |
碧云天生产的DH10Bac超级感受态细胞,英文名DH10Bac Super Competent Cells,是一种可以用于生产杆状病毒蛋白表达系统所需的大分子质粒DNA的克隆用E. coli DH10Bac即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,在严格按照使用说明进行操作时,转化效率可以达到1.0±0.5×108cfu/μg DNA。
DH10Bac菌株自身带有两个质粒:携带杆状病毒基因组的穿梭载体bMON14272和辅助质粒pMON7124。 后者介导bMON14272中的杆状病毒基因组和即将外源转入的表达载体(第三个质粒)之间的位点特异性重组,产生的大分子质粒DNA同时含有病毒基因组和表达重组蛋白的基因,并能在DH10Bac菌株中高效扩增。
DH10Bac菌株bMON14272包含mini-F复制子、卡那霉素抗性基因、attTn7位点和lacZα互补因子;辅助质粒pMON7124包含四环素抗性和tnsABCD区域,该区域表达转座反应所需的转座蛋白。携带T7转座原件(Tn7 element)的外源转入的表达载体(通常为pFastBac)带有庆大霉素抗性基因。因此可在卡那霉素、四环素和庆大霉素抗性的平板筛选阳性克隆[1]。
DH10Bac菌株的基因型为F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) ϕ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124。其中recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取;ϕ80lacZΔM15的存在使DH10Bac可用于蓝白斑筛选;mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10Bac菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D1029S | DH10Bac超级感受态细胞 | 10×100μl |
D1029M | DH10Bac超级感受态细胞 | 50×100μl |
- | 说明书 | 1份 |
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项:感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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