2×GoldStar MasterMix是由GoldStar DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、 dNTPs及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，预混好的PCR混合液使操作更加简单 快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含有的GoldStar DNA Polymerase是 一种经化学修饰的、全新高效Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭 ，使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特 异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独 特的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均 能高效扩增。特有的MasterMix配方使整个反应体系稳定性更强。用本品进行PCR扩增 ，PCR产物3'末端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本品不含染料，PCR程序结 束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。本产品特异性强，PCR扩增后 无需胶回收去除杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的 PCR、RT-PCR、多重PCR和基因芯片检测，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

质量控制

经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残留DNA；能有效扩增人基因组 中的单拷贝基因；2-8°C存放三个月，无明显活性改变。 

使用方法

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。 

1. PCR反应体系

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引 物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。 

2. PCR反应条件

注意： 

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理 想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条 件。 

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的GoldStar DNA Polymerase的扩增 效率为1-2 kb/min。 

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多， 错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 

4）本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。