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  • 2xEs Taq MasterMix
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  • 2xEs Taq MasterMix

    实验室试剂
    阿拉丁
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


英文名称

阿拉丁E665629


2xEs Taq MasterMix

储存温度-20°C储存,避免反复冻融
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

本品是由Es Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成 的预混体系，浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良 性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，超过98%的PCR扩增能一次成 功，同时复杂模板也能得到有效扩增，并可最大限度地减少人为误差和污染。本品不 含染料，PCR程序结束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。扩增得到 的大部分PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规 PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

E665629Component5ml25mlStorage
E665629A2×Es Taq MasterMix5×1ml5×5ml-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E665629BddH₂O5×1ml5×5ml-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

Notes: 2×Es Taq MasterMix contains Es Taq DNA Polymerase, 3mM MgCl2 and 400µM each dNTP.

质量控制：

经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增多种基 因组中的单拷贝基因。

使用方法：

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。 

1. PCR反应体系 

试剂50 μl反应体系终浓度
2×Es Taq MasterMix25 μl1×
Forward Primer，10 µM2 μl0.4 μM
Reverse Primer，10 µM2 μl0.4 μM
Template DNA<0.5 μg<0.5 μg/50 μl
ddH2Oup to 50 μl/

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高 引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2. PCR反应条件  

步骤温度时间/
预变性95℃2 min/
变性94℃30 s25-35 个循环
退火55-65℃30 s25-35 个循环
延伸72℃30 s25-35 个循环
终于延伸72℃2 min/

注意： 

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降 低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。 

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。 

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太 多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


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