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  • 2×Taq Plus MasterMix (Dye)
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  • 2×Taq Plus MasterMix (Dye)

    实验室试剂
    阿拉丁
    0-2000
    • ￥282.90-1197.90
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


别名

阿拉丁T665602


2×Taq Plus MasterMix（染料）

英文名称2×Taq Plus MasterMix (Dye)
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

本品是由Taq Plus DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组 成的预混体系，浓度为2×。与Taq DNA Polymerase相比，Taq Plus DNA Polymerase 扩增效率更高，保真性更优秀。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，超过 98%的PCR扩增能一次成功，同时复杂模板也能得到有效扩增，并可最大限度地减少 人为误差和污染。本产品已加入染料（蓝色），反应结束后可直接进行电泳检测。扩 增得到的大部分PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于 常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

T665602Component5ml25ml40mlStorage
T665602A2×Taq Plus MasterMix (Dye)1ml×55ml×51ml×40-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T665602BddH2O1ml×55ml×51ml×40-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

质量控制  

经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增多种基 因组中的单拷贝基因。 

使用方法

 以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。 

1. PCR反应体系 

试剂

50 μl反应体系

终浓度

2×Taq Plus MasterMix（Dye）

25 μl

1×

Forward Primer，10 µM

2 μl

0.4 μM

Reverse Primer，10 µM

2 μl

0.4 μM

Template DNA

<0.5 μg

<0.5 μg/50 μ

ddH2O

up to 50 μl

/

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高 引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。 

2. PCR反应条件 

步骤

温度

时间


预变性

94°C

2 min


变性

94°C

30 s

25-35 cycles

退火

55-65℃

30 s

25-35 cycles

延伸

72°C

30 s

25-35 cycles

终延伸

72°C

2 min



注意：

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降 低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。 

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq Plus DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。 

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太 多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


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