产品内容 | 组分 | 500ml | | 30% Acr-Bis (29:1) | 2×250ml |
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产品简介30% Acrylamide:Bis Solution (29:1) 即30%的丙烯酰胺, N,N′-亚甲双丙烯酰胺（29:1）的水溶液，简称30% Acr-Bis (29:1)。本产品常用于配制各种浓度的变性及非变性聚丙烯酰胺（PAGE）凝胶，进行常规的蛋白或核酸电泳实验，使用方便。 操作步骤根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，**胶浓度请参考附表1。 I灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2) 1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。 注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。 2. 将不同体积的30% Acr-Bis (29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。 3. 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。 4. 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液（对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端 1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可）， 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层， 使凝胶表面保持平整。 5. 静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。 II 灌制浓缩胶（各试剂使用量请参考附表3） 1. 去除覆盖在分离胶上的水层。 2. 将不同体积的30% Acr-Bis (29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。 3. 加入10%过硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。 4. 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。 5. 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。 6. 静置10~20分钟，等待浓缩胶聚合。 7. 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。 8. 进行常规电泳操作。 附表 附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与**分离范围  附表2. 配制SDS-PAGE分离胶 
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
Product content component | 500ml | 30% Acr-Bis (29:1) | 2×250ml |
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