阿拉丁的UltraBio™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX, 防污染型)，即UltraBio™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX, UDG)，是一种用于实时荧光定量PCR，即qPCR (Quantitative PCR)或real-time PCR的新型高品质防污染(Carryover prevention)预混液，主要用于cDNA和基因组DNA等的特异性超高灵敏度定量检测。本产品含有优化比例的高品质UDG酶和dUTP，可有效消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题造成的假阳性或CT值偏低。SYBR Green法一般也称染料法，所以本方法也常称作防污染型染料法。UDG (Uracil-DNA Glycosylase)，也称UNG (Uracil-N-glycosylase)，可催化含尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键发生水解，从而释放游离尿嘧啶，主要应用于消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。其防止污染的原理为：在PCR反应中加入适量的dUTP，以dUTP替代dTTP掺入DNA中，形成含dU碱基的PCR扩增产物；后续进行PCR反应时，使用UDG酶选择性切割可能被污染而带入的之前PCR扩增产生的含有dU的单链或双链DNA，从而避免之前的PCR扩增产物可能的污染对于本次PCR扩增带来的负面影响。UltraBio™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX, 防污染型)使用SYBR Green I作为染料。SYBR Green I是一种结合于双链DNA (double-strand DNA, dsDNA)双螺旋小沟区域的绿色荧光染料。SYBR Green I在游离状态下的荧光比较微弱，一旦与双链DNA结合后，其荧光会大大增强。这样通过检测荧光强弱就可以定量检测PCR过程中扩增产生的双链DNA的数量。本产品使用的UltraBio™ Taq DNA Polymerase是一种与抗体结合的高品质热启动酶，能够实现便捷高效的热启动。UltraBio™ Taq DNA Polymerase中的Taq酶与抗Taq酶的单克隆抗体相互结合，从而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性，这样可以有效避免在低温条件下由引物和模板DNA非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。在PCR反应的预变性步骤中抗体会被加热失活，这样可以确保仅在预变性后才会把Taq酶的活性释放出来，预变性之前不会发生DNA聚合反应，从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。本产品包含了UltraBio™ Taq DNA Polymerase、UDG酶、PCR Buffer、dNTPs、dUTP、SYBR Green I荧光染料、稳定剂和镁离子等所有的通用组分，使操作更简单、使用更便捷。用户只需自备引物、样品DNA和去离子水即可。本产品含低浓度ROX，适用于需低浓度ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。ROX的作用是用于校正与PCR无关的荧光波动，从而最大限度减少孔间差异。这种差异可能由多种因素引起，如移液误差及样品蒸发等。不同的荧光定量PCR仪对ROX的要求不同，请根据实际所用仪器选择含高浓度ROX (High ROX)、低浓度ROX (Low ROX)或不含ROX的UltraBio™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型)。通常含高浓度ROX的UltraBio™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX, 防污染型)也可以用于不需要ROX或需要低浓度ROX的荧光定量PCR仪。常用仪器所需ROX类型请参考如下表格。本产品如果用于常规的96孔板qPCR检测(建议反应体系为20µl)，每毫升本产品可以进行100次检测；如果用于常规的384孔板qPCR检测(建议反应体系为10µl)，每毫升本产品可以进行200次检测。

注意事项：

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