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  • 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒
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  • 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒

    实验室耗材
    阿拉丁
    2000-5000
    • ¥899.90-2399.90
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商品参数
  • 所属类别:实验室耗材
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:2000-5000
商品描述


品牌货号


英文名称

阿拉丁R598308


Renilla luciferase assay kit

储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。该产品为海肾萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。


产品特点:

1. 快速:细胞裂解在 10-15 min 内完成;

2. 方便:试剂易于配制,样品检测步骤简单。

使用方法:
1. 细胞裂解
(1)将培养基移除,加 PBS 轻轻洗涤(贴壁细胞可直接进行此操作,悬浮细胞要离心收集细胞)。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用无菌水按 4:1 稀释 A 组分),然后将培养板放在微型震荡器上室温震荡 15 min,充分裂解细胞。


注:裂解产物可室温保存 6 h,-70℃可长期存放(裂解产物不能多次反复冻融)。
(2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000 rpm 离心 3-5 min,离心后将上清液移入新的 EP 管中进行后续检测。
2. 工作液配制
(1)将所有组分恢复至室温。
(2)用组分 B 将组分 C 稀释成海肾萤光素酶工作液,稀释方法为将 1 µL C 组分加入到 49 µL B 组分中。
3. 化学发光值检测
(1)按照仪器操作说明书开启具有检测化学发光功能的仪器,如多功能酶标仪,设定参数,测定时间为 10 s,测定间隔为2 s。
(2)将细胞裂解产物按照 20~100 µL 的体积加入测量管中(保持每次样品量一致)。1×Lysis Buffer 为空白对照。
(3)加入 100 µL 海肾萤光素酶工作液,测定 RLU(Relative light unit)值(建议酶标仪设置 Shaking 混匀功能)。
注:海肾萤光素酶工作液不能长时间保存,现用现配,一次性使用完毕。 

注意事项:

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验;

2. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时,样品和试剂均需达到室温后再进行测定;

3. 海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 480 nm,为防止孔间干扰,建议使用白色不透光孔板;

4 ..B组分建议根据实验需求进行小批量分装;

5.建议现配现用,避免反复冻融;

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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备注:无质量问题不做退换货处理,下单前请仔细确认,感谢配合!