Bio-Nano 萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，符合高通量检测的需求。Bio-Nano萤光素酶是一个经过基因工程改造的小分子酶(19.1 kDa)，由进口公司发现，是性能卓越的生物发光报告基因。
本试剂盒使用一种新型底物，可产生高强度、辉光型发光，底物自主开发，国内使用无专利风险。本品信号强度是萤火虫以及海肾萤光素酶的150倍；超强信号稳定性，半衰期可达2小时。Bio-Nano萤光素酶的生物发光反应不依赖ATP，自发光背景低，光信号更亮， 同时抑制背景发光以获得最高检测灵敏度。
本品遵守严格的生产及质控程序，更加符合生物药研发企业使用，适于测定药物活性如ADCC或者其他用途。
反应原理如下： 

使用说明：
（一）自备材料
PBS；多道排枪；白色或黑色不透光细胞培养板；化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪。
（二）检测前准备

1、预先将Bio-Nano Luciferase Reaction Buffer 放置于室温融化。 

2、取出Bio-Nano Luciferase Substrate (50x)，每次开盖前需进行短暂低速离心。

3、检测工作液的配制：根据实际使用量，以50:1的比例将适量的Bio-NanoLuciferase Reaction Buffer 与 Bio-Nano Luciferase Substrate (50x)混匀，平衡至室温，避光备用。例如：如果需要100ml检测工作液，则需要加入2ml的检测底物。

注：

① 建议检测工作液每孔的加样体积与细胞培养液体积相同。 

② 建议现配现用，剩余的检测工作液在当次实验结束后，直接舍弃，不要留存。

（三）检测方法 

1、从细胞培养箱中取出已接种好待检细胞的细胞培养板，放置5-15min，恢复至室温。 

注：使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。 

2、加入检测工作液

使用多道排枪向每个细胞孔中加入平衡至室温的检测工作液，加样体积与细胞培养液体积相同并混匀。例如，96孔板通常加入80-100μl培养液，相应加入80-100μl检测溶液；384 孔板通常加入20-30μl培养液，相应加入20-30μl检测溶液。

3、孵育 

室温下避光孵育5-10min。为了使得细胞裂解充分，也可将细胞培养板放在振荡混匀仪或附带振板功能的仪器上，室温条件下，采用中高速振板5-10min。 

注：孵育时间，可根据细胞量进行适当调整，确保细胞充分裂解，得到稳定的发光检测结果。

4、检测

混匀后于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测Bio-Nano Luciferase活性。

注：为得到**检测结果，请在加入检测工作液后2小时内完成检测。

注意事项：

1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品， 不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。 

2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。 

3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测工作液以及细胞培养板平衡至室温。 

4、如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致， 再进行数据读取，以此获得**的检测结果。 

5、Bio-Nano 萤光素酶具有超强信号稳定性，半衰期可达2小时。但是当酶表达量过高时， 信号半衰期会缩短，建议优化实验设计方案（如减少质粒转染量），避免萤光素酶表达量过高。 

6、Bio-Nano Luciferase Substrate (50x) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有 时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规 格，并混匀后即可使用。 

7．Bio-Nano 萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 460nm。

物理外观：Liquid 

是否无菌：否