阿拉丁生产的T4 RNA Ligase 2，即T4 RNA连接酶2，是一种ATP依赖的双链RNA连接酶(double-strand RNA ligase, dsRNA Ligase)，也被称为T4 Rnl2 (gp24.1)，可以用于双链RNA进行分子内的环化连接和分子间的线性连接。T4 RNA Ligase 2与T4 RNA Ligase 1 ', "不同的是，对双链RNA中的缺刻(nick)的连接活性要大大高于对单链RNA末端的连接活性。T4 RNA Ligase 2也可用于双链核酸(RNA双链、RNA/DNA杂合链和/或DNA双链)分子内或分子间RNA链的3'羟基和DNA链的5'磷酸基的连接。T4 RNA Ligase 2连接时需要5'磷酸和3'羟基的存在，可以是RNA链或DNA链的5'磷酸基和RNA链的3'羟基之间发生连接反应。T4 RNA Ligase 2催化dsRNA粘端连接的反应过程如下。首先T4 RNA Ligase 2直接消耗ATP，形成中间产物T4 RNA Ligase 2-AMP，并释放焦磷酸；接着，T4 RNA Ligase 2-AMP与dsRNA的缺刻处相结合，并将AMP从中间产物T4 RNA Ligase 2-AMP中转移至dsRNA缺刻处的5'磷酸末端，形成腺苷酰化缺刻dsRNA中间产物；最后，在T4 RNA Ligase 2的催化下，dsRNA缺刻处的3'羟基进攻该缺刻处的5'磷酸基团，形成3'-5'磷酸二酯键，并释放出AMP。本产品酶活性高，连接效率高于国外同类竞争产品。本产品催化双链RNA粘端连接的效果请参考图1。图1. 阿拉丁生产的T4 RNA Ligase 2和N公司的同类产品(Competitor T4 RNA Ligase 2)催化连接dsRNA粘端连接的效果图。 RNA-1：5'-OH-GGGCUUUGCGUGGGUUU-OH-3'；RNA-2 (5'端磷酸化)：5'- pCUAUAGAAACCCACGCAAAGCCC-OH-3'，使用阿拉丁的R0051 Annealing Buffer for RNA oligos (5X)，参考说明书进行退火反应。退火获得的dsRNA，在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的T4 RNA Ligase 2 ，37°C孵育30min进行连接反应，反应完毕后立即取样用15%非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分析。如图所示，本产品与N公司的产品相比，实际的连接效率约为N公司产品的2倍，在本反应体系中阿拉丁生产的T4 RNA Ligase 2仅需2U就可以非常充分地完成连接反应。