阿拉丁的UltraBio™ Oligo (dT)25 Magnetic Beads (mRNA磁珠)，也称mRNA Magnetic Beads或Oligo dT磁珠(Oligo dT Magnetic Beads)，是一种使用Oligo (dT)25包被的磁珠，可与mRNA等尾部的poly(A)互补配对，用于稳定、高效、便捷地直接从动物组织或培养的动物细胞中或从总RNA中快速分离纯化获得高纯度完整的带有poly(A)的mRNA等RNA的磁珠。本产品纯化的带有poly(A)的mRNA、lncRNA等，可直接应用于RT-PCR、qPCR、高通量测序、mRNA文库的构建、mRNA的m6', "A等修饰分析、固相cDNA文库构建、Northern blot分析、RACE等分子生物学实验，还可用于mRNA疫苗的研发，如mRNA疫苗的纯化、3' Poly A尾长度检测时Poly A尾短链的分离纯化等1-2]。本产品分离纯化的poly(A) RNA中也可包含带有poly(A)的lncRNA等，但通常主要为mRNA，因此也常被称为mRNA磁珠。一个典型的哺乳动物细胞中，四种主要的大分子的质量和占比为：RNA, ∼20pg (1%); DNA, ~7pg (0.3%); protein, ∼500pg (20%); polysaccharide (多糖), ∼2μg (78.7%)。信使RNA (messenger RNA, 简称mRNA) 约占总RNA质量的4%，核糖体RNA (ribosomal RNA, 简称rRNA)约占80% 3]。本产品的原理和主要操作流程如图1所示。UltraBio™ Oligo (dT)25磁珠表面共价修饰了25聚dT序列即Oligo (dT)25，当真核细胞、动植物组织的裂解液或抽提的总RNA与UltraBio™ Oligo (dT)25', "磁珠混合后，磁珠表面的寡聚dT序列与mRNA等3'端的poly(A)进行碱基配对而特异性结合，然后在外界磁场的作用下，磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离，经洗涤充分去除杂质，最后用洗脱液将mRNA等从磁珠上洗脱下来，即可获得高纯度完整mRNA等带有poly(A)的RNA4-5]。图1.UltraBio™ Oligo (dT)25 Magnetic Beads (mRNA磁珠) 用于mRNA抽提的工作原理示意图。本产品盒具有提取效果稳定、纯度高、速度快、操作便捷等优点。本产品的mRNA提取体系经过反复测试和优化，能分离纯化获得总RNA中90%以上的mRNA，能从106个细胞中抽提约0.1-1µg mRNA，20mg小鼠肝组织能抽提约0.2-2µg mRNA，20mg小鼠肺组织能抽提约0.1-1µg mRNA。仅需裂解、结合、洗涤、洗脱等简单的操作，整个纯化过程不超过15分钟即可完成。所有操作都在同一个离心管中完成，操作便捷。提取的total RNA使用本产品进行mRNA的纯化效果参考图2。图2.UltraBio™ Oligo (dT)25 Magnetic Beads (mRNA磁珠) 用于从总RNA中纯化mRNA的效果图。使用RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) 抽提293T细胞的总RNA，同时使用本产品进行mRNA的纯化，然后使用UltraBio™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit 进行qRT-PCR检测，使用Actin、B2M和GAPDH的三对内参引物对比总RNA (Total RNA)和纯化的mRNA的Ct值。图中可见mRNA纯化前后的Ct值基本一致，说明mRNA的纯化效果接近100%。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。本产品磁珠粒径约为200nm，浓度约为5mg/ml。每毫克磁珠偶联的Oligo (dT)25约为300-400pmol，每毫克磁珠可纯化约2-3µg mRNA等poly(A) RNA，即每毫升磁珠可以纯化约10-15µg mRNA等poly(A) RNA。对于常规的mRNA纯化，按照每个样品使用20μl磁珠悬浊液，每1ml本磁珠可用于50次mRNA纯化。4℃保存，一年有效。其中UltraBio™ Oligo (dT)25磁珠长期不使用时，可以

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