品牌货号 别名 | 阿拉丁P748880 质粒pCMV-3X Flag-LTA |
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稳定性与储存 | -20℃保存。 |
英文名称 | pCMV-3X Flag-LTA |
储存温度 | -20°C储存 |
运输条件 | 超低温冰袋运输 |
产品介绍 | pCMV-3X Flag-LTA是阿拉丁自行研发生产的用于在哺乳动物细胞中表达带有3X Flag标签的LTA (large T antigen) (1-708aa)融合蛋白的质粒,可以方便地使用抗Flag标签的抗体来识别LTA蛋白的表达,或进行免疫共沉淀分析等。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;带有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性,可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌。而在转染哺乳动物细胞后,可使用G418 筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。G418和新霉素效果一致,但G418的细胞毒性更低。LTA即SV40大T抗原(SV40 large T antigen),也称SV40gp6 large T antigen (Macaca mulatta polyomavirus 1),由猿猴病毒40 (Simian virus 40, SV40)表达,全长708氨基酸,分子量为81.6kDa,是一种六聚体蛋白。当LTA单独表达时能诱导静止细胞的增殖和转化,可以诱导实验动物肿瘤的形成,为研究DNA复制和细胞转化提供了非常有用的模型1-3]。pCMV-3X Flag-LTA质粒的主要信息如下:pCMV-3X Flag-LTA质粒(7608bp)的图谱如下:pCMV-3X Flag-LTA质粒的详细图谱见说明书:https://www.aladdin-e.com/Manual/D3032 pCMV-3X Flag-LTA.pdf。pCMV-3X Flag-LTA中没有的酶切位点包括:pCMV-3X Flag-LTA中的单酶切位点包括:pCMV-3X Flag-LTA质粒中推荐使用的测序引物序列如下:CMV-F primer (769-789): 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3'BGH-R primer (3198-3215): 5'-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3'pCMV-3X Flag-LTA的全序列信息:D3032 pCMV-3X Flag-LTA-全序列.txt。在HEK293T细胞(人胚肾细胞)中共转pCMV-3X Flag-LTA和pCMV-HA-p53 ,经免疫共沉淀(Co-IP)实验验证,p53和LTA两种蛋白可以相互作用,具体参考Flag&HA Co-IP阳性对照质粒对。 |
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