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  • 重组高热稳定DNA 聚合酶
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  • 重组高热稳定DNA 聚合酶

    实验室试剂
    阿拉丁
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


产品名称

阿拉丁T295106


重组高热稳定DNA 聚合酶

规格或纯度EnzymoPure™
产品介绍

产品简介

本品是94 kDa的耐热性DNA聚合酶，通过将Thermus aquaticus DNA Polymerase的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后，分离提取而得到的，与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。具有5'→ 3'聚合酶活性和5'→ 3'外切酶活性，但无3'→ 5'外切酶活性。PCR产物的3'端带A，可克隆至T载体。


产品组成



使用方法

1.建议的 qPCR 反应体系

试剂使用量终浓度
Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μl)
0.25 μl 
1.25 U/50 μl
10×Taq Buffer for PCR
5 μl
1×
dNTP（10 mM）
1 μl
0.2 mM
正向引物（10 μM）
1 μl
0.2 μM
反向引物（10 μM）
1 μl
0.2 μM
模板 DNAa
X μl

ddH2O
To 50 μl

a. 不同模板**反应浓度有所不同，以 50 μl 体系为例：模板为基因组 DNA 时，一般使用量应在 10~400 ng；当模板为质粒或病毒 DNA 时，一般使用量应在10 pg~20 ng。


2. 常规 PCR 反应程序


a. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应，对于一些复杂模板，例如：菌液、菌落（尤 其是酵母）的 PCR 扩增，预变性时间可适当延长至 10 min，以提高预变性效果。

注 : 如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板，建议目的片段长度不超过 2.5 kb，若 超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。


质量控制

a.核酸内切酶残留检测：将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃ 温育 4 h，通过 DNA 电泳检测质粒无变化。

b.核酸外切酶残留检测：将酶液与双链 DNA 底物在 37℃ 温育 16 h，通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。

c.宿主残留检测：将酶液中残留的核酸经 E.coli 16S rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测，E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。

d.功能检测：能有效扩增多种基因组中的单拷贝基因。



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