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  • 2xEs Taq MasterMix
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  • 2xEs Taq MasterMix

    实验室试剂
    阿拉丁
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商品参数
  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:0-2000
商品描述


品牌货号


别名

阿拉丁E666027


PAGE专用PCR mix

规格或纯度for PAGE
英文名称2xEs Taq MasterMix
储存温度-20°C储存,避免反复冻融
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍

产品内容：

E666027Component5 mLStorage
E666027A2×Es Taq MasterMix (for PAGE)5×1 mL-20°C. Avoid freeze/thaw cycle.
E666027BddH₂O5×1 mL-20°C. Avoid freeze/thaw cycle.

Notes:  2×Es Taq MasterMix contain Es Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl₂ and 400 µM each dNTP.


产品简介：

本品是由EsTaq DNA Polymerase、Mg2+ 、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的 预混体系，浓度为2× 。EsTaq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。 独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定， 超过98%的PCR扩增能一次成功，同 时复杂模板也能得到有效扩增，并可最大限度地减少人为误差和污染。本品不含染料， PCR程序结束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。扩增得到的大部分 PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高 保真性有要求的基因克隆等实验， PCR扩增产物专用于聚丙烯酰胺凝电泳检测。

质量控制：

经检验无外源核酸酶活性； PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增多种基 因组中的单拷贝基因。

使用方法：

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1. PCR反应体系

试剂

50 μl反应体系

终浓度

2×Es Taq MasterMix（for Dye）

25 μl

1×

Forward Primer，10 µM

2 μl

0.4 μM

Reverse Primer，10 µM

2 μl

0.4 μM

Template DNA

<0.5 μg

<0.5 μg/50 μl

ddH2O

up to 50 μl



注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高 引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2. PCR反应条件

步骤温度时间/
预变性94℃2 min/
变性94℃30 s25-35 个循环
退火55-65℃30 s25-35 个循环
延伸72℃30 s25-35 个循环
终延伸72℃2 min/

注意：

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时， 适当降 低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定， Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太 多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


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