mTaq DNA Polymerase是通过缺失Taq DNA Polymerase N端一段氨基酸和突变 改造得到的新型DNA聚合酶。通过改造后使本产品能够全血中存在的抑制剂产生耐受 作用，能够直接扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先对基因组进行提取和纯化。 PCR产物3’端为A，可直接用于T/A克隆。

质量控制：

经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性； PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一 周，无明显活性改变。 

使用方法：

1. 使用前请将mTaq DNA Polymerase反复颠倒至完全混匀。 

2. 将PCR薄壁管置于冰上，加入除全血外的以下试剂。

注意： 

1）*加入全血前反复上下吸打完全混匀各种试剂、 

2）DNA模板：可以使用肝素钠、Na-EDTA、K-EDTA或柠檬酸钠处理全血。通常建议全血含量 为5-10%。不推荐使用高浓度血液。对于高GC含量的模板，加入10%DMSO。 

3）引物：寡核苷酸引物长度通常含20-30个核苷酸，并且最好GC含量在40-60%并均匀分布于引 物中。在常规的PCR反应中，引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。

3. 最后将全血加入管底。 

4. PCR反应条件  

注意： 

1）PCR仪于94-95℃预热，将样品放置于PCR仪上开始循环。 

2）mTaq提高了冷敏感性，具备了一些热启动特性。通常可以通过在冰上配制反应成分、最后 加入聚合酶以及将热循环仪预热至变性温度（95℃）后立即进行反应来避免非特异性产物的 产生。 

3）变性温度与时间：在PCR循环前为了充分裂解血液细胞和释放/变性DNA，要求初始变性为 95℃ 5分钟。 

4）退火温度与时间:退火时间通常为30秒-1分钟。退火温度可以低于理论退火温度（Tm）5℃开 始，通过梯度PCR进行优化。 

5）延伸时间：延伸反应通常在72℃下进行。一般每250-500 bp延伸时间为1分钟。推荐72℃ 10 分钟进行最终延伸。 

6）通常35-40个循环可以达到最优扩增。

5. 结果检测：反应结束后取5 µl反应产物并加上电泳缓冲液一起电泳检测结果。  

MTaq DNA Polymerase is a novel DNA polymerase obtained by deletion of a segment of amino acid at the N-terminus of Taq DNA Polymerase and mutation modification. Through modification, this product can produce tolerance to inhibitors present in whole blood, allowing for direct amplification of DNA in human and mouse whole blood samples without the need for prior genome extraction and purification. The 3 'end of the PCR product is A and can be directly used for T/A cloning.