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产品简介

该试剂盒适用于 从血浆 、 血清、 羊 水等 无细胞体 液中 纯化 回收游离 DNA （Free-circulating/Cell-free  DNA）。高盐时，游离DNA结合于硅基包被的磁珠表面。 漂洗后，游离DNA洗脱于RNase-Free Water 中。游离DNA的得率与样品类型、储存条 件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可用于 定量PCR、产前诊断等下游实验。

自备仪器、试剂

1 ．全自动核酸提取仪

2 ．无水乙醇、异丙醇

3 ．24 DW Plate and Tips Pack

实验前准备及重要注意事项

1 ．**次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1中加入无水乙醇。  2 ．**次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GCW2中加入无水乙醇。 3 ．若手动操作，在实验开始前将恒温混匀仪预热至60℃。

4 ．Magbeads ZN严禁冰冻和高速离心，否则可能会对Magbeads ZN造成不可逆的损 害。 Magbeads ZN每次使用时请充分振荡混合均匀。

5.  用前请先检查Buffer MPL 和 20% SDS是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现 象，可在37°C水浴几分钟，即可恢复澄清。

操作步骤（手动，以2mL血浆为例）

1 ．按下表向离心管中依次加入30 μL Proteinase K 、2 mL血浆、 100 μL 20% SDS ， 放于60℃、 1200 rpm恒温混匀仪上震荡20分钟，孵育结束后将离心管冰浴5-10 分钟。

注：如无恒温混合仪，将离心管涡旋震荡10秒钟后放于60℃水浴锅中孵育20分钟，期间每隔7分

钟涡旋震荡10秒钟。

为避免蛋白酶K失活，请按下表试剂顺序依次加入，请勿将SDS直接加到蛋白酶 K溶液中。

2 ．孵育过程中，按下表准备裂解液/磁珠混合液，并混合均匀。

3 ．将步骤2中准备的裂解液/磁珠混合液加到步骤1样本管中。涡旋震荡1分钟，然后 手工上下颠倒或使用混匀仪混匀5-10分钟，使磁珠一直处于悬浮状态。

4 ．将离心管放于磁力架上静置，待磁珠吸附到磁力架上，管内溶液变澄清后，翻转 离心管冲洗瓶盖上残留磁珠，再放置1分钟左右，之后弃去溶液。

5 ．向离心管中加入1 mL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），震荡混 匀后将混悬液转移到新的1.5 mL离心管中。

6 ．将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。

7 ．向离心管中加入1 mL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震 荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。

8 ．将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。

9 ．向离心管中加入1 mL Buffer GCW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋 震荡5秒钟后放于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。

10．将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。

11．重复步骤9-10。

12．离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，开盖室温 放置5-10分钟使乙醇充分挥发。

13．向离心管中加入50-100 μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱

液中，之后将离心管固定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟。

14．将离心管固定于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移 液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。