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  • 核糖核酸酶III (dsRNA-specific)
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  • 核糖核酸酶III (dsRNA-specific)

    实验室试剂
    阿拉丁
    5000-10000
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  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
  • 价格区间:5000-10000
商品描述


品牌货号


产品名称

阿拉丁R749972


核糖核酸酶III (dsRNA-specific)

别名RNase III(dsRNA 特异性) | 核糖核酸酶 III
英文别名Ribonuclease III (dsRNA specific)
规格或纯度ActiBioPure™, EnzymoPure™, 生物活性, 无动物源, 无载体, 无菌, 无DNA酶, 2.0 U/µL
生化机理Digests double-stranded RNA. Involved in the processing of primary rRNA transcript to yield the immediate precursors to the large and small rRNAs (23S and 16S). Processes some mRNAs, and tRNAs when they are encoded in the rRNA operon. Processes pre-crRNA and tracrRNA of type II CRISPR loci if present in the organism.
产品介绍

阿拉丁生产的RNase III,即核糖核酸酶III,是由阿拉丁自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种来源于大肠杆菌的双链RNA (Double-strand RNA, dsRNA)特异性的核糖核酸酶。在锰离子(Mn2+', ")存在的反应缓冲液中,RNase III可特异性地将较长的双链RNA (dsRNA)切割成长度约为18-25bp的3'羟基末端带有2-3个突出碱基的干扰RNA (siRNA) 1,2],该产物与Dicer酶切产生的底物类似,具有用于哺乳动物细胞的RNA干扰(RNA interference)、基因沉默、靶标确认等多种用途3]。RNase III不能水解DNA或单链RNA。阿拉丁生产的RNase III用于切割500bp双链RNA生成siRNA的效果请参考图1。图1. 阿拉丁生产的RNase III 切割500bp双链RNA生成siRNA的效果图。使用本产品或N公司(Competitor)的RNase III,在10µl反应体系(50mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 1mM DTT, 20µM MnCl2 (pH7.5 @25ºC))中加入1µg 500bp的dsRNA,以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的RNase III,然后用超纯水补至10µl,37ºC孵育20分钟进行反应。反应完成后立即加入终浓度为50mM的EDTA以终止反应。取反应后产物10μl加入2μl 6X DNA Loading Buffer ,1%的琼脂糖凝胶电泳,随后在紫外灯下观察实验结果。如图所示,本产品与N公司的RNase III产品相比,对500bp的dsRNA具有类似的酶切效果。dsRNA是使用T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit 将两条含T7启动子的500bp的互补DNA链进行体外转录生成两条互补的500nt单链RNA,随后使用Annealing Buffer for RNA Oligos (5X) 并按照该产品说明书推荐的程序,把这两条互补的500nt单链RNA进行退火反应得到的产物。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异,图中所示结果仅供参考。

用途:

dsRNA的水解酶切;产生siRNA;基因沉默;基因靶标确认 (target validation)。


来源:

纯化自携带编码大肠杆菌RNase III基因的E.coli重组菌株。


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