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  • DNase I (RNase Free)
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  • DNase I (RNase Free)

    实验室试剂
    阿拉丁
    0-2000
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  • 所属类别:实验室试剂
  • 产品品牌:阿拉丁
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商品描述


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规格或纯度

阿拉丁D665537


1000 U

英文名称DNase I (RNase Free)
储存温度-20°C储存
运输条件超低温冰袋运输
产品介绍产品内容:
ComponentD665537
1000 U


DNaseⅠ(RNase Free),1 U/µl1 ml
Reaction Buffer(with MgCl2),10×1 ml
200 mM EDTA1 ml

产品简介:

DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链DNA。 其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。 Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性,而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时 可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口;而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂,使 DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。

实验前准备及重要注意事项:

1.因为DNase I 经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验,所以在酶制备过程 中最大限度的避免了RNase污染,可以安全地用于RNA的提取,但由于该酶中不 含RNase 抑制剂,提醒使用时注意防止外源RNase的污染。 

2.DNase I受剪切力的影响比较大,使用前可以将离心管上下颠倒混匀,避免涡旋 震荡。 

3.每处理1 μg RNA,DNase I用量不要超过1U。

使用说明 

1.以制备用于RT-PCR的RNA样品为例,配置10µl反应体系,如下表:  

2.37℃孵育30分钟。 

3.加入1 µl 200 mM EDTA,65℃孵育10分钟,使DNase Ⅰ失活,终止反应。 

4.处理后的RNA可用于RT-PCR


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